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血液样品
细胞样品 组织样品 血液样品 cell-free样品 RNA提取
鉴于血液样本的不稳定性，我们建议客户在当地用新鲜样本提取 RNA。可以用于血液样本 RNA 提取的方案有Trizol 以及 QIAEN RNA Blood Mini kit 等，以上这些方法都可以提取到高质量的总 RNA。
一、白细胞的分离
对于大量的全血样本，需要首先分离白细胞，而后进行总 RNA 提取。
1、在已加入抗凝剂的新鲜全血中加入等体积 PBS（ 1×），充分混匀；
2、缓慢转入另一已加入淋巴细胞分离液的离心管中，并使上述混合液处于淋巴细胞分离液液面之上（即两种液体不要混合，保留清晰的面）， 3000 g 离心 30 min；
3、用移液枪小心分离出白细胞层；用 PBS（ 1×）清洗白细胞，离心回收白细胞，弃去上清；
4、加入白细胞 20 倍体积的 RNA Happy 或 Trizol 试剂，用一次性注射器进行反复抽打细胞直至看不见成团的细胞块，使之充分溶解并形成清亮不粘稠的液体；
5、放入干冰或-80℃冰箱中可以保存半周左右。
注意事项
1、血液样本保存是不稳定的，新鲜血液必须立即分离出白细胞或者直接提取 RNA 进行保存；
2、白细胞样本保存也是不稳定的，未加 Trizol 试剂保存的白细胞是非常不稳定的，白细胞样本务必按照上述过程进行保存；
3、请在-80℃冰箱中保存 RNA 或者白细胞样本；
4、血液样品经冻融即发生溶血，不能用于 RNA 的抽提。
二、单个核细胞的分离
对于大量的全血样本，如实验需要，可以首先分离单个核细胞，而后进行总 RNA 提取。
1、在离心管中加入 3-4ml Ficoll，再缓慢沿管壁滴加全血 5ml 左右（切忌破坏界面）。
2、室温水平离心， 2000rpm， 15 分钟。
3、用 Tip 头小心吸取中间一层薄的呈云雾状的单个核细胞。
4、用 PBS 或 HANKS 液或生理盐水或 1640 培养液洗涤单个核细胞溶液。
5、室温 1000rpm 离心洗涤 10min。
6、弃上清，再重复步骤 5 一次，合并各管。
7、 Trizol 试剂溶裂解细胞，保存于-80℃冰箱中待抽提 RNA。
